أطروحة دكتوراه في قسم علوم الحياة تناقش الكشف عن التغيرات النسيجية المرضية في رئة وكلى الفئران البيضاء التي تسببها والتأثير العلاجي لمستخلص الفطر داخل النبات للطالبة صحاري موفق محمود

يعد داء المستخفيات Cryptococcosis من الامراض الانتهازية لدى المرضى المثبطين مناعيا"، نظرا لقة المضادات الفطرية فضلا عن مقاومة الممرضات للمضادات الفطرية وتاثير السلبي للمضادات خاصة المضاد امفوترسين B المستخدم في علاج الامراض الجهازية لذا هدفت الدراسة الحالية الى التعرف على التغيرات النسيجية بالاصابة بخميرة Cryptococcus neoformans المعزولة من حالات سريرية مختلفة ومقارنة تاثير المضاد الامفوترسين B والبديل العلاجي لفطر داخل النبات (endophytic fungi) Cladosporium cucumerenium على نسيجي الرئة والكلى خلال المدة الزمنية من 1 /  10 / 2022 إلى 1 / 9 / 2023 ، تم جمع عينات سريرية مختلفة ( ادرار، قشع ، سائل النخاع الشوكي) من المرضى المثبطين مناعيا المراجعين لمستشفى البتول ومستشفى بعقوبة التعليمي في محافظة ديالى. وقد تم جمع 200 عينة سريرية من كلا الجنسين تراوحت اعمارهم بين (1-75) سنة لكلا الجنسين، توزعت بين 36 عينة قشع و41 عينة ادرار و47 عينة من سائل النخاع الشوكي وقد شخصت العزلات بالطرق التقليدية فضلا عن التشخيص باستخدام تقنية جهاز الفايتك وجزيئيا بطريقة تحلل التتابع النيوكلوتيدي للمنطقة IIS ضمن الجين SrR 5.8 . وكانت نتائج الفحص المجهري المباشر 130 إصابة وبنسبة (65%) والزرع المختبري  124 اصابة وبنسبة (62%). اذ تم عزل 31 عزلة من  Cryptococcus neoformunsوبنسبة (24.9%) فضلا عن انواع اخرى من الخمائر، حيث كانت 11 عزلة من Cryptococcus laurentii وبنسبة(%8.9) و8 عزلات من Cryptococcus albidus وبنسبة (6.8%) و38 عزلة من  Candida albicans وبنسبة مئوية     ( 30.3%)، 14 عزلة من tropical Candida بنسبة (11.4%)،9 عزلات من  guilliermondii Candida وبنسبة (7.2%)، 13 عزلة من   Trichosporom asahii(10.5%)  وتم فحص المحتوى الفينولي لراشح الفطر داخل النبات Cl. cucumerenium من خلال تقنية HPLC اذ كان يحتوي على مركبات الفعالة حيث كان اعلى مركب Rutin  بتركيز 20.3591 واقل مركب Gallic acid بتركيز 4.071 .

وتم اختبار القدرة التثبيطية لمستخلص المائي والكحولي والراشح الفطر داخل النبات Cl. cucumerenium بتركيزين 50% و100% تجاه الخميرة Cryptococcus spp.  بالمقارنة مع المضاد الفطري Amphotericin B ، وكان اعلى معدل تثبيط الراشح عند تركيز 100% تجاه العزلة لخميرة (2) Cryptococcus neoformus حوالي 10.0 ملم والمضاد الفطري حوالي 6.5 ملم مقارنة بالمستخلص المائي والكحولي اذ بلغ معدل التثبيط 2.34 و 3.78 ملم على التوالي . وتضمنت هذه الدراسة أيضا دراسة التأثيرات النسيجية المرضية بعد إجراء إصابة ذكور الفئران البيضاء المختبرية بالخميرة واختبار كفاءة راشح الفطر داخل النبات كعلاجا" تجريبيا" نسيجيا" ضد الإصابة المستحدثة في الفئران ومقارنته بالمضاد الحيوي Amphotercin B ، اذ تم استخدام 50 ذكر فأر أبيض مختبري وزعت الى 10 مجاميع بواقع 5 فئران لكل مجموعة، بينت النتائج ان الفئران عانت من  فقدان الشهية وكثرة الحركة مقارنة مع مجموعة السيطرة . اما نتائج الفحص النسيجي لعضو (الرئة والكلى)  فقد تمثلت التغيرات النسيجية - المرضية في الرئة بارتشاح الخلايا الالتهابية في النسيج البيئي للرئة مع احتقان الأوعية الدموية وتثخن للقصبات، وقد زادت هذه التغيرات في المجموعة المثبطة بالإضافة الى ما ذكر أنفا لوحظ وجود تثخن في النسيج البيئي للأسناخ مع وجود احتقان دموي، ووجود الخميرة داخل تجويف الأوعية الدموية وفي بعض الأسناخ الرئوية .كما أظهرت نتائج المقاطع النسيجية للفئران المعالجة بالمضاد الفطري تغيرات قريبة للمجاميع واحتقان دموي وتظهر القصيبة الهوائية (Br) وتثخن جدران الاسناخ الرئوية (TW)، في حين بينت نتائج الفئران المعالجة بمستخلص الراشح الفطر داخل النبات تغيرات اقل من المجاميع اذ يظهر الاسناخ الرئوية (Alv) والاكياس السنخية (AVS) بشكل شبه طبيعي، اما التغيرات النسيجية - المرضية في الكلى فتمثلت المجموعة المعاملة بالخميرة بظهور توسف وانسلاخ بطانة النبيبات الكلوية (DES) وتنخر قسم من خلايا بطانة النبيبات (N) ووجود نزف دموي (H) بين خلايا النبيبات مع ملاحظة تكون السدادة الزجاجية (CST) و المعاملة بالكورتزون فقط  يظهر وجود نزف دموي (H) بين خلايا النبيبات مع حصول تليف (Fb) واحتقان (CON) الوعاء الدموي مع تنكس (D)خلايا بطانة النبيبات البولية ، المعاملة بالراشح الفطر داخل النبات فقط  تظهر الكبيبة الكلوية (G) والنبيب والنبيبات البولية (UT)  والفراغ حول الكبيبة (C) بشكل طبيعي، المعاملة بالمضاد الفطري  فقط  يظهر وجود نزف دموي (H) ضمن نسيج الكلية وتضخم الكبيبة الكلوية، المعاملة بالكورتزون والخميرة والمضاد الفطري يوضح يظهر ارتشاح واضح للخلايا الالتهابية (IF) وتثخن جدران الوعاء الدموي (TW) مع ملاحظة تحلل دموي (HL)، المعاملة بالكورتزون والخميرة والراشح الفطري يوضح الكبيبات الكلوية (G) والنبيبات الكلوية (UT) بشكل شبه طبيعي. وهذا يشير الى ان إعطاء مستخلص الراشح الفطر داخل النبات كعلاج تجريبي قد اسهم بشكل فعال وواضح في تقليل التغيرات النسيجية – المرضية لنسيجي الرئة والكلى.